顧愷之精工詩詞文賦，尤精繪畫。擅肖像、歷史人物、道釋、禽獸、山水等題材。畫人物主張傳神，重視點睛，認為“傳神寫照，正在阿堵(指眼睛)中”。注意描繪生理細節，表現人物神情，畫裴楷像，頰上添三毫，頓覺神采煥發。善于利用環境描繪來表現人物的志趣風度。畫謝鯤像于巖壑中，突出了人物的性格志趣。其畫人物衣紋用高古游絲描，線條緊勁連綿，如春蠶吐絲，春云浮空，流水行地，自然流暢。顧愷之的作品無真跡傳世。流傳至今的《女史箴圖》、《洛神賦圖》、《列女仁智圖》等均為唐宋摹本。
顧愷之在繪畫理論上也有突出成就，今存有《魏晉勝流畫贊》、《論畫》、《畫云臺山記》3篇畫論。提出了傳神論、以形守神、遷想妙得等觀點，主張繪畫要表現人物的精神狀態和性格特征，重視對所繪對象的體驗、觀察，通過形象思維即遷想妙得，來把握對象的內在本質，在形似的基礎上進而表現人物的情態神思，即以形寫神。顧愷之的繪畫及其理論上的成就，在中國美術占有極其重要的地位。
顧愷之著有《啟蒙記》3卷，另有文集20卷，均已佚。但仍有一些詩句流傳下來，如“千巖競秀，萬壑爭流，草木蒙蘢，若云興霞蔚”等，細致生動地描寫了江南的秀麗景色，充滿詩情畫意。
東晉興寧年間（公元363—365年）顧愷之在金陵（今南京）瓦寺所畫的維摩詰像，有“清羸示之容，憑幾忘言之狀”，畫出了維摩詰的容及中與人對談時的特殊神色。這一幅維摩詰像，雖沒有流傳下來，但受到稱頌。同時，這一記載也說明中國流傳的佛教圖像，不是完全模仿外來的藝術。

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